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酶標(biāo)儀在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用
點擊次數(shù):3387 更新時間:2013-11-13
hbzhan內(nèi)容導(dǎo)讀:酶聯(lián)免疫檢測儀,是酶聯(lián)免疫吸附試驗的儀器。可簡單地分為半自動和全自動2大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來分析抗原或抗體的含量。ELISA測定一般要求測試液的zui終體積在250ul以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求。
目前在國內(nèi)血站臨床試驗室中,酶聯(lián)免疫吸附試驗已成為zui主要的免疫測定技術(shù),由于大部分ELISAzui后以比色測定,使酶標(biāo)儀成其它各類型酶標(biāo)儀為ELISA測定的重要工具。八十年代初,當(dāng)酶免疫測定技術(shù)從國外引進時,基本上均使用肉眼判斷結(jié)果,難以滿足臨床測定要求。目前國內(nèi)醫(yī)院和血站實驗室所使用的酶標(biāo)儀絕大部分為進口儀器,品種型號多達數(shù)十種。
軟件功能是酶標(biāo)儀所具有的對ELISA定性和定量測定及其他測定方式如酶動力學(xué)、紫外、凝集等的統(tǒng)計分析并報告結(jié)果的功能,是判斷酶標(biāo)儀質(zhì)量的一個指標(biāo)。ELISA測定,酶標(biāo)儀需具有陽性判斷值(Cutoff)及測定灰區(qū)的統(tǒng)計計算功能,如血站實驗室篩選獻血員進行抗-HCV、HBSAG、抗-HIV測定時,常遇到測定吸光度處于Cutoff附近,但又低于Cutoff的樣品,這樣的血輸給患者導(dǎo)致輸血后傳染疾病的可能性增大。若設(shè)定灰區(qū),以灰區(qū)下限作為判斷標(biāo)準(zhǔn),可減少輸血后傳染疾病的可能性。此外四參數(shù)測定的劑量反應(yīng)曲線適合于定量酶免疫測定曲線的擬合。因此,如果目的為定量測定,要有這種曲線回歸方程計算分析功能。其他如連點、直線等回歸計算,可根據(jù)酶標(biāo)儀的應(yīng)用目的而定。
丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)的測定,是對獻血者*的篩查項目之一。方法上有速率法和賴氏法等。若采用賴氏試管法,費工、費時,不但從方法上得不到統(tǒng)一,而且不利于計算機對原始數(shù)據(jù)的網(wǎng)絡(luò)化管理。若采用微板酶標(biāo)儀定量(U/L)方法,利用酶標(biāo)儀與計算機接口,聯(lián)接血站局域網(wǎng)絡(luò),這就同其他酶法檢測項目一樣,實現(xiàn)了實驗室原始數(shù)據(jù)的計算機管理。
采用試管法檢測Rh血型,操作繁鎖,肉眼判讀結(jié)果缺乏客觀性。故將平底微板法與酶標(biāo)儀掃描,電腦自動判讀打印技術(shù)相結(jié)合,用TCEAN全自動加樣分析系統(tǒng)完成。經(jīng)常規(guī)13032份標(biāo)本的檢測,符合率達100%。利用酶標(biāo)儀法檢測Rh血型具有較好的重復(fù)性、準(zhǔn)確性,操作簡便快速、判讀結(jié)果客觀可靠,也易于原始結(jié)果的保存,提高自動化程度,能的篩選獻血者,有利于實驗室的標(biāo)準(zhǔn)化管理,也有利于血站稀有血型庫的建立。
生長曲線一般指菌落總數(shù)CFU/mI。或者菌落總數(shù)的對數(shù)logCFU/ml。隨時間變化曲線,可用來展示微生物生長情況和新陳代謝規(guī)律。由于受試菌數(shù)量/濃度與菌懸液的光學(xué)密度(opticaldensity,OD)值成正比,所以生長曲線也常用OD-t曲線表示。目前菌懸液OD值主要通過可見分光光度計測定,其在評價微生物生長狀態(tài)時可以得到滿意的結(jié)果。但是該方法存在一定缺點:即時性差;需反復(fù)采樣,操作繁瑣;取樣和檢測過程中培養(yǎng)基容易感染雜菌;作為懸濁液,細菌有一定的沉降速率,檢測時間的長短會對OD值產(chǎn)生影響,導(dǎo)致實驗再現(xiàn)較為困難[7]。由于酶標(biāo)儀是一種快速、準(zhǔn)確、高通量的儀器,所以我們總會選擇使用酶標(biāo)儀來進行菌懸液OD值的測定,來提高工作效率,節(jié)約時間。
除測定菌懸液OD值外,酶標(biāo)儀還可用來檢測細菌濃度。例如:各類紡織品與人類生活關(guān)系密切,其表面附著的微生物可能是疾病傳播的重要媒介或與體表微生物相伴形成一種有機的微生態(tài)關(guān)系[8]。隨著時代的發(fā)展,各種抗菌織物產(chǎn)品不斷出現(xiàn),但對評價抗菌紡織品的
抑菌效果尚無規(guī)范的方法,所以,建立一種科學(xué)評價織品抗菌效果的方法對衛(wèi)生微生物學(xué)和微生態(tài)學(xué)研究均具有重要價值。由于活菌計數(shù)誤差較大而且工作繁瑣,不適用于大批量標(biāo)本的檢測,因而利用酶標(biāo)儀檢測細菌濃度便可建立檢測織品抑菌效果的有效方法。
目前在國內(nèi)血站臨床試驗室中,酶聯(lián)免疫吸附試驗已成為zui主要的免疫測定技術(shù),由于大部分ELISAzui后以比色測定,使酶標(biāo)儀成其它各類型酶標(biāo)儀為ELISA測定的重要工具。八十年代初,當(dāng)酶免疫測定技術(shù)從國外引進時,基本上均使用肉眼判斷結(jié)果,難以滿足臨床測定要求。目前國內(nèi)醫(yī)院和血站實驗室所使用的酶標(biāo)儀絕大部分為進口儀器,品種型號多達數(shù)十種。
軟件功能是酶標(biāo)儀所具有的對ELISA定性和定量測定及其他測定方式如酶動力學(xué)、紫外、凝集等的統(tǒng)計分析并報告結(jié)果的功能,是判斷酶標(biāo)儀質(zhì)量的一個指標(biāo)。ELISA測定,酶標(biāo)儀需具有陽性判斷值(Cutoff)及測定灰區(qū)的統(tǒng)計計算功能,如血站實驗室篩選獻血員進行抗-HCV、HBSAG、抗-HIV測定時,常遇到測定吸光度處于Cutoff附近,但又低于Cutoff的樣品,這樣的血輸給患者導(dǎo)致輸血后傳染疾病的可能性增大。若設(shè)定灰區(qū),以灰區(qū)下限作為判斷標(biāo)準(zhǔn),可減少輸血后傳染疾病的可能性。此外四參數(shù)測定的劑量反應(yīng)曲線適合于定量酶免疫測定曲線的擬合。因此,如果目的為定量測定,要有這種曲線回歸方程計算分析功能。其他如連點、直線等回歸計算,可根據(jù)酶標(biāo)儀的應(yīng)用目的而定。
丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)的測定,是對獻血者*的篩查項目之一。方法上有速率法和賴氏法等。若采用賴氏試管法,費工、費時,不但從方法上得不到統(tǒng)一,而且不利于計算機對原始數(shù)據(jù)的網(wǎng)絡(luò)化管理。若采用微板酶標(biāo)儀定量(U/L)方法,利用酶標(biāo)儀與計算機接口,聯(lián)接血站局域網(wǎng)絡(luò),這就同其他酶法檢測項目一樣,實現(xiàn)了實驗室原始數(shù)據(jù)的計算機管理。
采用試管法檢測Rh血型,操作繁鎖,肉眼判讀結(jié)果缺乏客觀性。故將平底微板法與酶標(biāo)儀掃描,電腦自動判讀打印技術(shù)相結(jié)合,用TCEAN全自動加樣分析系統(tǒng)完成。經(jīng)常規(guī)13032份標(biāo)本的檢測,符合率達100%。利用酶標(biāo)儀法檢測Rh血型具有較好的重復(fù)性、準(zhǔn)確性,操作簡便快速、判讀結(jié)果客觀可靠,也易于原始結(jié)果的保存,提高自動化程度,能的篩選獻血者,有利于實驗室的標(biāo)準(zhǔn)化管理,也有利于血站稀有血型庫的建立。
生長曲線一般指菌落總數(shù)CFU/mI。或者菌落總數(shù)的對數(shù)logCFU/ml。隨時間變化曲線,可用來展示微生物生長情況和新陳代謝規(guī)律。由于受試菌數(shù)量/濃度與菌懸液的光學(xué)密度(opticaldensity,OD)值成正比,所以生長曲線也常用OD-t曲線表示。目前菌懸液OD值主要通過可見分光光度計測定,其在評價微生物生長狀態(tài)時可以得到滿意的結(jié)果。但是該方法存在一定缺點:即時性差;需反復(fù)采樣,操作繁瑣;取樣和檢測過程中培養(yǎng)基容易感染雜菌;作為懸濁液,細菌有一定的沉降速率,檢測時間的長短會對OD值產(chǎn)生影響,導(dǎo)致實驗再現(xiàn)較為困難[7]。由于酶標(biāo)儀是一種快速、準(zhǔn)確、高通量的儀器,所以我們總會選擇使用酶標(biāo)儀來進行菌懸液OD值的測定,來提高工作效率,節(jié)約時間。
除測定菌懸液OD值外,酶標(biāo)儀還可用來檢測細菌濃度。例如:各類紡織品與人類生活關(guān)系密切,其表面附著的微生物可能是疾病傳播的重要媒介或與體表微生物相伴形成一種有機的微生態(tài)關(guān)系[8]。隨著時代的發(fā)展,各種抗菌織物產(chǎn)品不斷出現(xiàn),但對評價抗菌紡織品的
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